讲述了孤儿彼得·帕克〈安德鲁加菲尔德 饰〉从小寄居在梅姨(莎莉费尔德 饰)与班叔(马丁辛 饰)家中，内向害羞的他在校里虽常被欺负，但随着帕克爱上学校的风云人物格温·史黛西〈艾玛斯通 饰〉后，两小无猜的纯纯初恋让他孤独的生命找到希望。当帕克在班叔家中发现父亲留下的一个神秘包包后，他开始寻找当年双亲离奇失踪的线索，并因此找上父亲当年实验室的伙伴康纳博士(瑞斯伊凡饰)。在一次意外遭蜘蛛咬伤后，帕克突然拥有异于常人的飞天攀爬能力，成为媒体与社会讨论挞伐的神秘人物：蜘蛛人。蜘蛛人的秘密让帕克必须在女友及她担任警察局长的父亲面前隐藏身分，而当他发现康纳斯博士的真实身份其实是大反派蜥蜴博士康纳斯，帕克该如何面对外界对蜘蛛人身份与能力的质疑，不顾一切挺身而出，拯救纽约市民免于灾难呢？

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